(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210358172.0 (22)申请日 2022.04.06 (71)申请人 江西农业大 学 地址 330045 江西省南昌市南昌经济技 术 开发区志敏大道1 101号 (72)发明人 王纯荣　张欢　谭智美　王翠萍　 关琦　曾佩　吴国强　洪艳平　 颜贤仔　余莉莉　 (74)专利代理 机构 南昌新天下专利商标代理有 限公司 3 6115 专利代理师 施秀瑾 (51)Int.Cl. G01N 21/65(2006.01) G01N 21/01(2006.01) G01N 1/28(2006.01) (54)发明名称 基于化学衍生-表 面增强拉曼技术快速检测 蜂蜜中果胶含量的检测方法 (57)摘要 基于化学衍生 ‑表面增强拉曼技术快速检测 蜂蜜中果胶含量的检测方法， 首先配制不同浓度 半乳糖醛酸工作液， 在进行衍生化处理， 得到具 有不同浓度的半乳糖醛酸标准品衍生液； 再将 SERS基底与半乳糖醛酸标准品衍生液结合进行 信号增强， 而后进行拉曼光谱测试， 再绘制半乳 糖醛酸标准品衍生液的拉曼光谱 标准曲线； 最后 对半乳糖醛酸标准品衍生液的拉曼光谱标准曲 线进行验证。 本发明无需对蜂蜜进行预处理， 直 接对衍生化溶液进行表面增强拉曼测试， 即可实 现对蜂蜜中的果胶的定性以及定量分析， 果胶含 量以半乳糖醛酸含量计， 有效简化操作步骤， 能 够简单、 快速、 准确地实现蜂蜜中果胶含量的定 性和定量分析。 权利要求书2页 说明书5页 附图2页 CN 114720451 A 2022.07.08 CN 114720451 A 1.基于化学衍生 ‑表面增强拉曼技术快速检测蜂蜜中果胶含量的检测方法， 其特征在 于， 具体步骤如下： (1)配制不同浓度半乳糖醛酸工作液； (2)对步骤(1)配制的不同浓度半乳糖醛酸工作液， 进行衍生化处理， 得到具有不同浓 度的半乳糖醛酸标准品衍 生液； (3)半乳糖醛酸标准品衍 生液的拉曼光谱测试 将SERS基底与步骤(2)获得的半乳糖醛酸标准品衍生液结合进行信号增强， 而后进行 拉曼光谱测试； (4)绘制半乳糖醛酸标准品衍 生液的拉曼光谱标准曲线与紫外可 见光谱标准曲线 以半乳糖醛酸标准品衍生液的浓度为横 坐标， 1083cm‑1的拉曼强度为纵坐标， 绘制半乳 糖醛酸标准品衍 生液的拉曼光谱标准曲线； 以半乳糖醛酸标准品衍生液的浓度为横坐标， 525nm处的吸光度为纵坐标， 根据不同浓 度中半乳糖醛酸标准品衍生液的紫外光谱绘制半乳糖醛酸标准品衍生液的紫外可见光谱 标准曲线； (5)验证半乳糖醛酸标准品衍 生液的拉曼光谱标准曲线 对通过蜂蜜样品进行衍生化处理得到的蜂蜜样品衍生液进行拉曼光谱检测， 而后再将 制备的蜂蜜样品衍生液进行紫外可见光谱测试， 通过获得 的紫外可见光谱标准曲线， 计算 蜂蜜样品衍生液中半乳糖醛酸浓度， 以验证通过半乳糖醛酸标准品衍生液的拉曼光谱标准 曲线计算所 得的半乳糖醛酸浓度准确性； 蜂蜜样品中果胶含量以半乳糖醛酸含量计。 2.根据权利要求1所述的基于化学衍生 ‑表面增强拉曼技术快速检测蜂蜜中果胶含量 的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 所述半乳糖醛酸工作液的制备方法为： 首先制备 1000mg/L的半乳糖醛酸原液， 将0.1g半乳糖醛酸溶于100mL超纯水中， 得到半乳糖醛酸质量 浓度为1000mg/L的半乳糖醛酸原液， 而后用超纯水将制备的半乳糖醛酸原液稀释成为： 浓 度为0.01mg/L、 0.1mg/L、 1mg/L、 5mg/L、 10mg/L、 10 0mg/L的半乳糖醛酸工作液。 3.根据权利要求1所述的基于化学衍生 ‑表面增强拉曼技术快速检测蜂蜜中果胶含量 的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中， 所述半乳糖醛酸工作液进 行衍生化处理具体为： 首先 取等体积的具有不同浓度的半乳糖醛酸工作液， 再依次在所取不同浓度的半乳糖醛酸工作 液中加入等体积的盐酸溶液， 混合摇匀后， 置于不高于100℃水浴中加热数分钟后， 自然冷 却至室温， 得到半乳糖醛酸标准品衍 生液。 4.根据权利要求3所述的基于化学衍生 ‑表面增强拉曼技术快速检测蜂蜜中果胶含量 的检测方法， 其特 征在于， 所述水浴温度为5 0℃～90℃， 加热时间为5～12mi n。 5.根据权利要求1所述的基于化学衍生 ‑表面增强拉曼技术快速检测蜂蜜中果胶含量 的检测方法， 其特 征在于， 步骤(3)中， 所述SERS基底由纳米材 料制备而成。 6.根据权利要求1所述的基于化学衍生 ‑表面增强拉曼技术快速检测蜂蜜中果胶含量 的检测方法， 其特 征在于， 步骤(5)中， 所述蜂样品衍 生液进行拉曼光谱检测具体为： 准确称取数份蜂蜜样品， 每份0.5g， 分别在每份蜂蜜样品中加入一定量的纯果胶标准 品制备成蜂样品衍生液， 再按照步骤(3)所述， 将SERS基底与蜂样品衍生液进 行拉曼光谱信 号增强后， 使用拉曼光谱仪进行拉曼光谱测试。 7.根据权利要求1所述的基于化学衍生 ‑表面增强拉曼技术快速检测蜂蜜中果胶含量权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114720451 A 2的检测方法， 其特征在于， 步骤(5)中， 所述蜂蜜样品果胶含量以半乳糖醛酸含量计， 如下 式： 式(1)中， X ‑半乳糖醛酸含量， c ‑蜂蜜样品中半乳糖醛酸质量浓度， 单位为mg/L； V ‑溶液 定容体积， 单位 为mL； m‑蜂蜜样品质量， 单位 为g； 取三次平行测定值的平均值作为蜂蜜样品的测定结果， 三 次平行测定值间的相对平均 偏差不应大于 5％， 结果保留至小数点后两位。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114720451 A 3