(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210596470.3 (22)申请日 2022.05.30 (71)申请人 赣南师范大学 地址 341000 江西省赣州市 蓉江新区师院 南路1号赣南师 范大学 (72)发明人 陈依兰　江文婷　郭丽红　李丹　 张湘晴　杨力　贾新建　罗序中　 廖烈强　 (74)专利代理 机构 北京中仟知识产权代理事务 所(普通合伙) 11825 专利代理师 张田 (51)Int.Cl. A61K 9/06(2006.01) A61K 31/444(2006.01) A61K 47/10(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝 胶制剂的制备方法及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种注射型吡啶酰胺衍生物 小分子原位凝胶制剂的制备方法及其应用， 包括 步骤一， 原料选取； 步骤二， 3,5－吡啶二甲酰氯 合成； 步骤三， 酰胺衍生物的合成； 步骤四， 产品 制备； 本发明将衍生物溶解于PEG溶剂中， 得到 可 注射的制剂， 通过调控凝胶因子的浓度， 达到调 控原位凝胶稳定性， 便于根据不同的治疗需求， 设计多种性质 的原位凝胶制剂， 应用于不同场 景， 同时本发 明的凝胶与依 赖温度升高而形成凝 胶的温敏性凝胶相比， 具有不受注 射时环境温度 的影响， 具有更大、 更宽的使用范围， 并且制备方 法流程极为简便， 制备的凝胶制剂生物相容性 好， 并且对药物的缓释效果优异， 在药物的精准 靶向治疗方面具有极大的实用前 景。 权利要求书2页 说明书8页 附图4页 CN 114983931 A 2022.09.02 CN 114983931 A 1.一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的制备方法， 包括步骤一， 原料选 取； 步骤二， 3,5－吡啶二甲酰氯合成； 步骤三， 酰胺衍生物的合成； 步骤四， 产品制备； 其特 征在于： 其中上述 步骤一中， 首 先按照配方设计称取适 量的聚乙二醇和3,5－吡啶二甲酸备用； 其中上述步骤二中， 当步骤一中的原料选取完成后， 取用100ml的圆底烧瓶， 将步骤一 中的3,5－吡啶二甲酸加入， 随即向烧瓶中加入二氯亚砜与2 ‑4滴引发剂， 在65 ‑75℃下进行 回流， 随后减压蒸馏溶剂后得到 3,5－吡啶二 酰氯固体待用； 其中上述步骤三中， 取用适量的3－氨基吡啶溶解到无水二氯甲烷中备用， 制成3,5－ 吡啶二酰氯溶液备用， 随后， 称量适量的3－氨基吡啶加入到250ml的圆底烧瓶中， 加入 无水 二氯甲烷作为溶剂溶解， 并加入3mL的三乙胺， 随后在冰浴条件下逐滴加入上述制得的3, 5－吡啶二酰氯溶液， 在常温下搅拌反应， 然后将溶液抽滤， 并用去离子水淋洗多 次， 60‑80 ℃下真空干燥24小时得到酰胺衍 生物PDA‑N3备用； 其中上述步骤四中， 当步骤三中的PDA ‑N3制备完成后， 适量纯化后的酰胺衍生物PDA ‑N3 加入到步骤一中称取的聚乙二醇中， 8 0‑90℃下加热直至完全溶解， 冷却 后即制成注 射型吡 啶酰胺衍 生物小分子原位凝胶制剂。 2.根据权利要求1所述的一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的制备方 法， 其特征在于： 所述步骤二中， 3,5－吡啶二甲酸和二氯亚砜的摩尔比为1:2， 引发剂为N, N－二甲基甲酰胺， 反应时间为3.5 ‑4.5h。 3.根据权利要求1所述的一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的制备方 法， 其特征在于： 所述步骤三中， 3,5－吡啶二甲酰氯10mmol， 3－氨基吡啶为20mmoL， 三乙胺 的量为3mL， 反应时间为10 ‑24h。 4.根据权利要求1所述的一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的制备方 法， 其特征在于： 所述步骤四中， 聚乙二醇原料选自医用级的PEG200、 PEG400和PEG600中的 任意一种。 5.根据权利要求1所述的一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的制备方 法， 其特征在于： 所述 步骤四中， 纯化处 理溶解所用溶剂为 二氯甲烷， 萃取剂为去离 子水。 6.根据权利要求1所述的一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的制备方 法， 其特征在于： 所述 步骤四中， 纯化的方法为： 用乙醇比水重结晶， 80℃下真空干燥24h 。 7.一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的应用， 包括步骤一， 浓度设计； 步 骤二， 药物负载； 步骤三， 检测分析； 其特 征在于： 其中上述步骤一中， 根据不同的治疗需求， 设计多种性质的原位凝胶制 剂， 应用于不同 场景， 即调整酰胺衍生物PDA ‑N3在不同级别聚乙二醇中的含量， 得到不同浓度的原位凝胶 制剂， 加水得到水凝胶， 加水之后形成的原位凝胶冷冻干燥后呈纤维状结构， 按照上述制备 方法制成原位凝胶制剂备用； 其中上述步骤二中， 将步骤一中的调整浓度之后的原位凝胶制 剂作为注射用药物负载 的支架或载体， 也可用于靶向缓释治疗药物的负载， 用于临床治疗； 其中上述步骤三中， 将VB12 分别以10mg/L、 150mg/L、 200mg/L的浓度负载于该种吡啶酰 胺衍生物小分子凝胶材料中， 每隔一定时间取上层缓冲液， 以紫外－可见分光光度法测试， 同时将人脐静脉内皮细胞置于干凝胶薄膜沉积的96孔板中， 在细胞培养箱中培养， 每隔一权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114983931 A 2定时间用5 μmol/L的钙 黄绿素－AM染色， 并用荧光倒置显微镜观 察其活力情况， 并且用Cell   Counting  Kit‑8法对细胞增殖情况进行检测分析， 另外， 将该吡啶酰胺衍生物小分子物质 的PEG溶液注射至小鼠体内， 观察 其胶凝状态及降解或代谢情况。 8.根据权利要求7所述的一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的应用， 其 特征在于： 所述 步骤一中， 酰胺衍 生物PDA‑N3在聚乙二醇中的浓度为 4‑20g/L。 9.根据权利要求7所述的一种注射型吡啶酰胺衍生物小分子原位凝胶制剂的应用， 其 特征在于： 所述步骤三中， 当溶剂为PEG400时， 控制凝胶因子的浓度6g/L， 原位凝胶在小鼠 体内可保持15天左右； 而当凝胶因子为10g/L时， 原位凝胶在小鼠体内可保持21天左右， 之 后被降解或代谢。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114983931 A 3