SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T40132013 代替SN0708-1997 出口食品中异菌残留量的测定 气相色谱-质谱法 Determination of iprodione residues in foodstuffs forexport--GC-MSmethod 2014-06-01实施 2013-11-06发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 Www chabz. cn SN/T 4013—2013 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准代替SN0708—1997《出口粮谷中异菌脲残留量检验方法》。 本标准与SN0708--1997相比，主要技术变化如下： 适用范围增加了大米、大豆、猪肉、牛肉、鸡肝、牛奶、橙子、蓝莓、菠菜、洋葱、胡萝卜、板栗和茶 叶，删除了糙米； 删除了抽样部分内容； 样品的提取由丙酮修改为乙腈或酸性乙腈提取； 样品的净化由弗罗里硅土柱修改为N-丙基乙二胺（PSA)、十八烷基硅烷（ODS)和石墨化炭黑 分散剂； 测定方法由气相色谱法修改为气相色谱-质谱法； 方法测定低限由0.05mg/kg修改为0.01mg/kg。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：杨长志、胡琛、吴岩、王维、王传松、韩广源、魏冬旭、刘永、田丰、康庆贺。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN0708—1997。 I ww chabz. c cn SN/T4013—2013 出口食品中异菌腺残留量的测定 气相色谱-质谱法 1范围 本标准规定了食品中异菌脲残留量的气相色谱-质谱测定方法。 本标准适用于大米、大豆、猪肉、牛肉、鸡肝、牛奶、橙子、蓝莓、菠菜、洋葱、胡萝卜、板栗和茶叶中异 菌腺残留量的检测和确证。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中残留的异菌脲用酸性乙腈或乙腈提取，提取液经N-丙基乙二胺（PSA）、十八烷基硅烷 （ODS)和石墨化炭黑净化，用气相色谱-质谱仪检测和确证，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 乙腈：色谱纯。 4.2 乙酸（99.5%）。 4.3丙酮。 4.4乙酸钠。 4.5氯化钠。 4.6 无水硫酸镁：经650℃灼烧4h，置于干燥器内备用。 4.7 1%乙酸乙腈溶液：取10mL乙酸（4.2），加人990mL乙腈（4.1），混匀。 4.8 异菌脲标准品：Iprodione，CAS：36734-19-7，纯度大于或等于99%。 4.9 标准溶液包括： 异菌脲标准储备溶液：准确称取适量异菌脲的标准品，用丙酮（4.3)溶解并定容至100mL棕色 容量瓶中，得浓度为100μg/mL的标准储备溶液，此溶液转移至储液瓶中一18℃下储存六 个月。 b）标准中间溶液：准确吸取异菌脲标准储备溶液12.5mL于50mL棕色容量瓶中，用丙酮稀释 成浓度为25.0μg/mL的标准中间溶液，此溶液转移至储液瓶中一18℃下储存三个月 c）标准工作溶液：根据需要使用前用空白样品基质配制适当标准工作溶液。 4.10 0石墨化炭黑吸附剂：120μm~400μm。 1 www chabz. cn SN/T4013—2013 4.11 N-丙基乙二胺（PSA）吸附剂：40μm~60μm。 4.12 十八烷基硅烷（ODS）键合相：40μm~60μm。 4.13 有机相滤膜：0.22μm。 5 仪器和设备 5.1 气相色谱-质谱联用仪：配化学电离（CI)源。 5.2 电子天平：感量0.1mg，0.01g。 5.3 粉碎机。 5.4 组织捣碎机。 5.5 离心机：4000r/min。 5.6 旋涡混合器。 5.7 氮吹仪。 5.8 均质器：10000r/min。 5.9 螺旋盖聚丙烯离心管：50mL、15mL 5.10 玻璃具塞离心管：15mL。 6 试样制备与保存 6.1 试样制备 6.1.1橙子、蓝莓、菠菜、洋葱、胡萝卜 取有代表性样品约500g（不可用水洗涤），将其可食部分切碎后，用组织捣碎机将样品加工成浆状， 装入洁净容器作为试样，密封并标明标记 6.1.2大豆、大米、茶叶 取有代表性样品约500g，用粉碎机粉碎，混匀，装入洁净容器作为试样，密封并标明标记。 6.1.3猪肉、牛肉、鸡肝、板栗 取有代表性样品约500g，将其可食部分切碎后，用组织捣碎机充分捣碎均勾，装入洁净容器作为试 样，密封并标明标记。 6.2 试样保存 大豆、大米、茶叶和牛奶等试样于常温下保存；橙子、蓝莓、菠菜、洋葱、猪肉、牛肉、鸡肝、胡萝卜、板 栗等试样于一18℃以下保存。在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 7测定步骤 7.1提取 7.1.1大豆、大米、茶叶和板栗 称取试样5g（茶叶试样2g，精确到0.01g）于50mL离心管中，加入10mL水，于旋涡混合器上混 2 ww chabz. cn SN/T4013—2013 合30s，放置15min。加人3g无水硫酸镁（4.6）、1g氯化钠（4.5）、1g乙酸钠（4.4）和15mL1%乙酸乙 腈溶液（4.7），用均质器以10000r/min均质2min，4000r/min离心5min。将上清液转移至25mL 容量瓶中。另取一50mL螺旋盖聚丙烯离心管，加人10mL1%乙酸乙溶液，洗涤均质器刀头20s； 用玻璃棒捣碎离心管中的沉淀，加人上述洗涤均质器刀头的溶液，在旋涡混合器上混合2min，4000r/min 离心5min，有机相层合并至同一25mL容量瓶中，并用乙定容至刻度，待净化。 7.1.2猪肉、牛肉、鸡肝、牛奶、橙子、菠菜、胡萝卜和洋葱 称取试样约5g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加入5mL水、3g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g 乙酸钠和15mL1%乙酸乙腈溶液，用均质器以10000r/min均质2min，4000rmin离心5min。将 上清液转移至25mL容量瓶中。另取 （一50mL螺旋盖聚内烯离心管，加人10mL1%乙酸乙腈溶液， 洗涤均质器刀头20s；用玻璃棒捣碎离心管中的沉淀，加入上述洗涤均质器刀头的溶液，在旋涡混合器 上混合2min，4000r/min离心5min，有机相层合并至同一25mL容量瓶中，并用乙定容至刻度，待 净化。 7.1.3蓝莓 称取试样约5g（精确到0.01g）于50 mL离心管中，加人5mL水、3g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g 0000r/min均质2min，40001/min 乙酸钠和15mL乙腈，用均质器以10 离心5min。将上清液转移 至25mL容量瓶中。另取一50mL螺旋盖聚丙烯离心管，加人10mL乙，洗涤均质器刀头20s；用玻 璃棒揭碎离心管中的沉淀，加人上述洗涤均质器刀头的溶液，在旋涡混合器上混合2min，4000r/min离心 5min，有机相层合并至同一25mL容量瓶中，并用乙睛定容至刻度，待净化。 7.2净化 7.2.1大豆、大米、板栗、猪肉、牛肉、牛奶、洋葱 移取8mL上述提取液于15mL螺旋盖聚丙烯离心管 中，加入 300mg无水硫酸镁、250mgPSA （4.11）和500mgODS（4.12），在旋涡混合器 上混合2min，4 000r/min离心5min。准确移取5mL净 化液于15mL玻璃具塞离心管中，经60℃氮吹仪吹干后，用丙酮溶解并定容1.0mL，过0.22μm滤膜 （4.13）供气相色谱-质谱仪测定。 7.2.2 2鸡肝、橙子、菠菜、蓝莓、胡萝卜和茶叶 移取8mL上述提取液于15mL螺旋盖聚内烯离心管中，加人300mg无水硫酸镁、250mgPSA、 500mgODS和80mg石墨化炭黑（4.10），在旋涡混合器上混合2min，4000r/min离心5min。准确 移取5mL净化液于15mL玻璃具塞离心管中，经60℃氮吹仪吹干后，用丙酮溶解并定容1.0mL，过 0.22μm滤膜供气相色谱-质谱仪测定。 7.3测定 7.3.1 气相色谱-质谱条件 气相色谱-质谱条件如下： a)1 色谱柱：VF-1701ms右英毛细管柱，0.25mm（内径）×30m，0.25μm，或相当者； b）仓 色谱柱温度：初始温度200℃保持2min，以20℃/min升至260℃，保持8min； c) 进样口温度：300℃； (P 色谱-质谱接口温度：250℃； 3 www chabz. cn SN/T4013—2013 e) 载气：氮气，纯度大于99.999%，恒流模式，1.4mL/min； f) 进样量：1μL； g) 进样方式：无分流进样，0.75min后开阀； 电离方式：负化学电离； i) 电离能量：168.5eV； j) 离子源温度：150℃； k） 四极杆温度：150℃； 1) 反应气：甲烷，纯度大于99.99%； m）测定方式：选择离子监测方式； n) 选择监测离子（m/z）：定量244，定性245、246、248； o) 溶剂延迟：3.0min。 7.3.2气相色谱-质谱检测和确证 根据样液中被测物的含量情况，选定浓度与样液相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中异 菌腺响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。 在上述气相色谱-质谱条