SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3432—2012 向日葵茎溃疡病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Diaporthe helianthi Muntanola-Cvetkovic 行业标准信息服务平台 2012-12-12发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3432—2012 行业标准信 中华人民共和国出人境检验检疫 行业标准 向日葵茎溃疡病菌检疫鉴定方法 SN/T3432—2012 * 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)64275323 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本880×12301/16印张0.75字数12千字 2013年6月第一版2013年6月第一次印刷 印数1—1600 SN/T3432-2012 书号：155066·2-25282定价16.00元 SN/T3432—2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国新疆出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：王文正、张祥林、杜洪忠、李焱、张江国。 行业标准信息服务平台 I SN/T3432—2012 向日葵茎溃疡病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了向日葵茎溃疡病菌的分离培养及分子生物学鉴定方法。 本标准适用于进出境向日葵种子和田间向日葵植株中向日葵茎溃疡病菌的检疫和鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则 SN/T1809进出境植物种子检疫规程 3向日葵茎溃疡病菌基本信息 学名：有性态：DiaporthehelianthiMuntanola-Cvetkovic Mihaljcevic etPetrov; 无性态：PhomopsishelianthiMunt.-Cvetk.,Mihaljc.&.M.Petrov。 分类地位：有性态为子囊菌亚门（Ascomycotina）、核菌纲（Pyrenomycetes）、球壳目（Sphaeriales）、 间座壳科（Diaporthaceae）、间座壳属（Diaporthe）；无性态为半知菌亚门（Deuteromycotina）、腔孢纲 （Coelomycetes），球壳孢目（Sphaeropsidales）、球壳孢科（Sphaeropsidaceae），拟茎点霉属（Phomopsis）。 传播途径：该病菌近距离传播主要靠分生孢子借助雨水飞溅、病残体以及农事操作工具传播，远距 离传播主要通过带菌向日葵种子调运和种子中夹带的病残体传播 向日葵茎溃疡病菌的其他相关信息参见附录A。 4鉴定原理 根据向日葵茎溃疡病菌在寄主上的为害症状、形态学特征、培养性状和PCR特异性扩增片段作为 鉴定依据。 5仪器和用具 5.1仪器 体视显微镜、生物显微镜、超净工作台、PCR扩增仪、电泳仪、凝胶成像仪、光照培养箱、电子天平 （1/1000g）、高压灭菌器、冰箱。 5.2用具 手持放大镜、培养皿、酒精灯、镊子、剪刀、解剖刀、样品筛（10目，Φ1.7mm）、修枝剪、接种针、载玻 片、盖玻片、封口膜、菌种保藏管、离心管（1.5mL）、可调微量加样器及其配套枪头（10μL～1000μL）。 1