SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4044—2014 出口肉及肉制品中 假单胞菌属的计数方法 Enumeration of presumptive Pseudomonas spp in meat and meat products for export 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4044—2014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：杨向莹、李辑、杨娜、徐超、张子宏、刘朝晖 行业标准信息服务平台 1 SN/T4044—2014 出口肉及肉制品中 假单胞菌属的计数方法 1范围 本标准规定了肉及肉制品中假单胞菌属（Pseudomonasspp.）计数的方法。 本标准适用于肉及肉制品中假单胞菌属的计数。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 假单胞菌属 Pseudomonas spp. 在本标准规定的检验条件下，在CFC琼脂平板上形成氧化酶阳性菌落的细菌。 设备和材料 3.1 灭菌设备：高压蒸汽灭菌锅和干热灭菌箱。 3.2 恒温培养箱：25℃±1℃。 3.3 恒温水浴箱：47℃土2℃。 天平：感量0.01g。 3.4 3.5 均质器。 3.6 无菌吸管：1mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及无菌吸头。 3.7 无菌锥形瓶：容量100mL、250mL 3.8 无菌培养皿：直径90mm 标准信息服务平台 3.9 无菌试管。 3.10 pH计。 3.11 无菌涂布棒。 3.12 无菌接种环。 4 培养基和试剂 4.1 CFC琼脂，见A.1。 4.2 氧化酶试剂：见A.2。 5 检验程序 检验程序见图1。 1 SN/T 4044—2014 检样 25g样品+225mL稀释液，均质 10倍系列稀释 选择23个适宜稀释度的样品匀液 各取0.1mL接种CFC平板，涂布均匀 25℃±1℃ 44 h±4 h 计数菌落 氧化酶试验确证 报告结果 假单胞菌属计数方法检验程序 6操作步骤 6.1样品匀液的制备 6.1.1以无菌操作称取25g样品，置于盛有225mL灭菌生理盐水的无菌均质杯中，于8000r/min~ 10000r/min均质1min～2min，制成1：10的样品匀液；或于装有225mL灭菌生理盐水的灭菌均质 袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1：10的样品匀液。 6.1.2若需配制1：100样品匀液，可取1：10样品匀液1mL加人盛有9mL灭菌生理盐水的灭菌试 管中，混匀。更高稀释度的样品匀液可按此方法操作。 6.2接种和培养 6.2.1根据对样品污染程度的估计，选择2～3个合适的稀释度，每个稀释度接种2个CFC琼脂平板。 6.2.2用移液管或移液器吸取0.1mL初始样品匀液于CFC琼脂平板上。对随后的连续稀释度的样品 匀液重复上述操作，每个稀释度换一支无菌吸管或无菌吸头。 2