SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4534.1—2016 商品化试剂盒检测方法 黄曲霉毒素M1方法一 Commercial kit methodAflatoxin M,Test method I 行业标准信息服务平台 2016-06-28发布 2017-02-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4534.1—2016 前言 本部分为SN/T4534商品化试剂盒检测方法黄曲霉毒素M，的第1部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、深 圳市检验检疫科学研究院、合肥工业大学、南京卫岗乳业有限公司。 本部分主要起草人：薛峰、钱志娟、王毅谦、蒋原、陈伟、毕思远、蔡宝亮、李东明、曾德新、刘小军、 吴卫东。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4534.1—2016 商品化试剂盒检测方法 黄曲霉毒素M1方法一 1范围 SN/T4534的本部分规定了纯牛奶中黄曲霉毒素M1残留量的胶体金免疫层析检测方法。 本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中黄曲霉毒素M残留进行筛选检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法 3原理 应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的黄曲霉毒素MI与检测线上的黄曲霉毒素 M抗原共同竞争胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中黄曲霉毒素 M，的含量定性判定。 4试剂与材料 4.1 黄曲霉毒素M，检测试剂盒 本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价 结果参见附录A。 商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃~8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个 月。试剂盒组成如下： a）黄曲霉毒素M检测试纸条； 心服务平台 b）微孔试剂（主要成分为胶体金标记的黄曲霉毒素M抗体） 4.2试剂 黄曲霉毒素M对照品。 5 仪器设备 5.1温育器：40℃±2℃。 5.2便携式读数仪： 测量波长：525nm，带宽土8nm，波长准确度土3nm。 计算方式：峰面积分析，并可计算检测线峰面积/控制线峰面积比值。 SN/T 4534.1—2016 5.3移液器：200μL 6样品制备 检测前样品需充分混匀。 7分析步骤 7.1将温育器温度设定为40℃；吸取200μL样品于微孔中，5~10次抽吸，迅速混合均匀并置于温育 器中温育8min 7.2温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育6min。 7.3温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。 7.4检验完毕，余下的测试条密封好放到试剂盒中，2℃～8℃保存。 8结果判定 通过对比控制带和检测带的颜色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变 化，需在5min内进行结果判定。 a）目视结果判定依据（如图1所示）： 1）无效：控制线（C线）不显色。 2） 阴性：检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者强。 弱阳性：检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当 4) 阳性：检测线（T线）不显色，或检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色浅或者弱。 吸水纸 控制线 NC膜 黄曲霉素M检测线 海绵端 1 试纸条示意图 空白试纸 无效 阴性 弱阳性阳性 图1目视判定示意图 b）通过便携式读数仪对试纸条读值，并依据下列方式进行判定： 1）阴性：读数数值>1.1,则判为阴性 2）弱阳性：0.9≤读数数值≤1.1，则判为弱阳性；需要重新检测，若结果依然为弱阳性，则判 2