SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4541.1—2016 商品化试剂盒检测方法 硝基呋喃类 方法一 Commercial kit methodNitrofuransTest method I 行业标准信息服务平台 2016-06-28发布 2017-02-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4541.1—2016 前言 本部分为SN/T4541《商品化试剂盒检测方法 去硝基呋喃类》的第1部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、深 圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国福建出人境检验检疫局、合肥工业大学。 本部分主要起草人：薛峰、王凯民、王丙涛、倪鹏、蒋原、蔡宝亮、朱海、肖陈贵、郑晶、陈伟。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4541.12016 商品化试剂盒检测方法 硝基呋喃类 方法一 1范围 SN/T4541的本部分规定了虾组织中呋喃它酮代谢物、呋喃西林代谢物、呋喃妥因代谢物和呋喃 唑酮代谢物残留的胶体金免疫层析检测方法。 本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对虾组织中呋喃它酮代谢物、呋喃西林代谢物、喃妥因 代谢物和呋喃唑酮代谢物残留进行筛选检测。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法 3原理 应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的呋喃类代谢物与检测线上的抗原共同竞争 胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中呋喃类代谢物的含量定性 判定。 4试剂与材料 4.1 硝基呋喃类代谢物检测试剂盒 本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价 结果参见附录A。 服务平台 商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃8℃干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于 12个月。试剂盒组成如下： a）呋喃唑酮代谢物检测试纸条； b) 呋喃它酮代谢物检测试纸条； c) 呋喃西林代谢物检测试纸条； d) 呋喃妥因代谢物检测试纸条； 呋喃唑酮代谢物微孔（主要成分为胶体金标记的呋喃唑酮抗体）； f) 味喃它酮代谢物微孔（主要成分为胶体金标记的呋哺它酮抗体）； g) 喃西林代谢物微孔（主要成分为胶体金标记的喃西林抗体）； 喃要因代谢物微孔（主要成分为胶体金标记的呋喃妥因抗体）； i) 衍生化试剂（主要成分为硝基二甲醛溶液）； 1 SN/T4541.1—2016 试剂A（主要成分为盐酸）； k）i 试剂B（主要成分为磷酸氢二钾溶液）； 试剂C（主要成分为氢氧化钠溶液）； m) i 试剂D主要成分为氯化钠溶液）； n) 氧化试剂（主要成分为DDQ） 4.2试剂 除特殊注明外，所用试剂均为分析纯，所用水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.2.1呋喃唑酮代谢物、呋它酮代谢物、呋喃西林代谢物和呋喃妥因代谢物对照品。 4.2.2正已烷。 4.2.3乙酸乙酯。 仪器设备与耗材 5.1 移液器：200μL。 5.2移液器：10mL。 5.3氮吹仪或空气吹干仪。 5.4匀质器。 5.5涡旋震荡仪。 5.6离心机。 5.7滴管：5mL。 5.8离心管：50mL。 5.9 离心管：15mL。 6样品制备 6.1将虾去皮取肉，用习质器匀质样品至糊状。 6.2称取6g士0.1g均质后的样品于干净的50mL离心管中，依次加入8mL蒸馏水，1mL试剂A和 400uL衍生化试剂，拧紧盖子剧烈振荡5min，65℃水浴孵育30min。 6.3依次加人2mL试剂B,0.8mL试剂C和10mL的乙酸乙酯，拧紧盖子剧烈振荡3min 6.4室温4000r/min离心5min，取6mL上层溶液于干净的15mL离心管中，65℃氮吹仪或空气吹 干仪吹干。 6.5加人2mL正已烷溶解干燥物，振荡混合1min，加入1.3mL试剂D充分振荡混合1min，静置 5min后下层即为待测液 7分析步骤 7.1吸取200μL待测液样品于对应的四种硝基呋喃的反应微孔中，抽吸5～10次混合均匀，室温温育 5 min。 7.2温育结束后，将相对应的四种硝基喃的检测试纸条插入相应的反应微孔中（吸水海绵端向下）室 温温育3min。 7.4检验完毕，余下的测试条密封好放到试剂盒中，2℃~8℃保存。 2