SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4545.2—2016 商品化试剂盒检测方法 沙门氏菌 方法二 Commercial kit methodSalmonellaTest method I 行业标准信息服务平台 2016-08-23发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4545.2—2016 前 言 本部分是SN/T4545的第2部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出入境检验检 疫局。 本部分主要起草人：曾静、张西萌、付溥博、韩笑、王紫薇、汪琦、郑晶。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4545.22016 商品化试剂盒检测方法 沙门氏菌方法二 1范围 SN/T4545的本部分规定了食品中沙门氏菌显色培养筛选和乳胶凝集快速检测方法。 本部分适用于食品中沙门氏菌的定性检测。 本部分应用的显色筛选培养基可检测所有血清型的沙门氏菌；乳胶凝集反应只适用于除A群和 F群外的沙门氏菌。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 SN/T 2775 商品化食品检测试剂盒评价方法 SN/T 3266 食品微生物检验方法确认技术规范 3生物安全措施 为了保护实验室人员的安全和防止污染，应由具备资格的工作人员检测沙门氏菌。所有培养物、 DNA提取物和废弃物应按照GB19489和GB/T27403中的有关规定执行。 4方法原理 首先，利用显色筛选培养基来判定是否存在沙门氏菌，显色筛选培养基中添加C8酯酶和β-D葡糖 苷酶，C8酯酶在24h内使沙门氏菌呈现紫红色菌落，β-D葡糖苷酶使非沙门氏菌呈其他颜色，即可通过 菌落颜色进行判定。然后，利用乳胶凝集实验（latexagglutination test）来对除部分A群和F群以外的 沙门氏菌进行确认，乳胶颗粒表面包被与除部分A群和F群以外的沙门氏菌的特异性抗原具有特异性 一步实验确证。 5试剂和材料 5.1沙门氏菌快速检测试剂盒 本试剂盒参考SN/T2775和SN/T3266由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会组 织评价。具体评价结果参见附录A。试剂盒组成如下： 1 SN/T 4545.2—2016 a) 缓冲蛋白陈水(BPW)； b) 显色筛选培养基：伯乐生命医学产品（上海）有限公司的产品； c) 抑菌胶囊：伯乐生命医学产品（上海）有限公司的产品； d) 乳胶凝集试剂：伯乐生命医学产品（上海）有限公司的产品 试剂盒储存于2℃～8℃，有效期14个月。 5.2 沙门氏菌质控菌株 沙门氏菌标准菌株。 仪器和设备 6 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a) 冰箱：2℃~5℃。 b）恒温培养箱：41.5℃±1℃，37℃±1℃。 c) 均质器、振荡器。 d) 电子天平：感量0.1g。 e) 无菌锥形瓶：容量500mL，250mL。 f) 无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。 g) 无菌培养皿：直径90mm。 h) pH计或pH比色管或精密pH试纸。 7 检测程序 食品中沙门氏菌快速检测方法二的流程图见图1。 行业标准信息服务平台 2